
二氧化碳培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵設(shè)備,其穩(wěn)定性和無(wú)菌環(huán)境對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果至關(guān)重要。以下是日常使用和維護(hù)的詳細(xì)指南:
一、日常使用規(guī)范
1. 開(kāi)機(jī)前檢查
確認(rèn)電源、CO?氣源(壓力≥0.1MPa)和減壓閥連接正常。
檢查水箱水位(如為水套式),確保覆蓋加熱元件。
清潔內(nèi)腔,用75%酒精擦拭內(nèi)壁、擱板和傳感器探頭。
2. 參數(shù)設(shè)置
設(shè)定溫度(通常37℃±0.2℃)、CO?濃度(5%±0.1%)及濕度(≥95%)。
啟用紫外滅菌(如有)30分鐘后再放入培養(yǎng)物。
3. 樣品操作
穿戴手套,動(dòng)作迅速,減少開(kāi)門時(shí)間(≤30秒)。
培養(yǎng)瓶/皿擺放間隔≥1cm,確保氣流循環(huán)。
記錄放入時(shí)間、樣本信息及參數(shù)狀態(tài)。
4. 監(jiān)控與校準(zhǔn)
每日記錄溫濕度、CO?濃度(比對(duì)紅外傳感器與外部檢測(cè)儀)。
每周用FBS或PBS驗(yàn)證濕度(蒸發(fā)量≤0.2mL/day)。
二、定期維護(hù)要點(diǎn)
1. 清潔消毒
每周:移除樣品,用無(wú)菌蒸餾水擦拭內(nèi)腔,避免腐蝕性消毒劑損傷傳感器。
每月:清潔(包括門封條),用0.1%新潔爾滅或過(guò)氧化氫噴霧消毒。
污染處理:霉菌污染時(shí),需空載運(yùn)行90℃高溫滅菌(若設(shè)備支持)。
2. 關(guān)鍵部件維護(hù)
HEPA過(guò)濾器:每6個(gè)月更換或檢測(cè)風(fēng)速(≥0.3m/s)。
CO?傳感器:每6個(gè)月通入標(biāo)準(zhǔn)氣體(如5% CO?)校準(zhǔn),偏差>0.3%需更換。
水盤:每周更換無(wú)菌蒸餾水,防止微生物滋生(濕度敏感實(shí)驗(yàn)需用超純水)。
3. 長(zhǎng)期停用
排空水箱,斷電前運(yùn)行空箱干燥程序。
重新啟用時(shí)更換所有過(guò)濾器,執(zhí)行3次空載滅菌循環(huán)。
三、常見(jiàn)問(wèn)題處理
CO?濃度不穩(wěn)定:檢查氣瓶壓力、管路漏氣(肥皂水檢測(cè))或傳感器故障。
溫度波動(dòng)大:確認(rèn)門密封性(夾紙測(cè)試)、水套水量或加熱元件狀態(tài)。
污染跡象:立即停止使用,滅菌并檢測(cè)培養(yǎng)物支原體。
四、安全注意事項(xiàng)
避免使用乙醇擦拭觀察窗(可能導(dǎo)致龜裂)。
高溫滅菌時(shí)需佩戴隔熱手套,防止?fàn)C傷。
報(bào)警功能測(cè)試:每月模擬觸發(fā)超溫/CO?不足報(bào)警,驗(yàn)證響應(yīng)速度。

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